【摘要】 目的：探讨胃癌组织尾侧型同源转录因子2(DX2)和E钙粘蛋白(Ead)的表达与浸润、转移及预后的关系. 方法 ：胃癌患者86例，以正常胃黏膜15例为对照， 应用 SAB免疫组化方法检测DX2和Ead的表达. 结果：正常胃黏膜上皮中Ead完全表达，而DX2不表达. 胃癌Ⅰ～Ⅱ期DX2与Ead的异常表达率分别为51.2%和54.9%，Ⅲ～Ⅳ期的DX2异常表达率下降，而Ead的则提高，分别为25.1%和78.8%，各分期间的差异有统计学意义(P<0.05). 伴有淋巴结转移的55例患者中，DX2异常表达率为67.1%, 而Ead异常表达率为86.8%，均分别与相应的无淋巴结转移组存在统计学差异（P<0.01）. 此外，DX2和Ead的表达还与细胞分化程度、肿瘤生长方式、癌细胞浸润深度及患者5 a生存率有关(P<0.05). 结论：DX2和Ead与胃癌的发生、浸润、转移有关，可联合判断预后.
【关键词】 DX2基因；E钙粘蛋白；临床病 理学 ；胃肿瘤；预后
0引言
近年来，大量 研究 已证实胃癌的发生、 发展 和预后是多基因改变的结果. 研究胃癌相关基因及其蛋白分子不仅对于理解胃癌的发病机制十分重要，而且对于发现在诊断和评价预后中有临床意义的分子标记物也同样重要. 尾侧型同源转录因子2 (audal type hebx transriptin fatr2, DX2)是人体中肠道特异性表达的核转录因子，在肠黏膜上皮细胞的发育及保持其形态、结构特征中起着重要作用. DX2在结直肠肿瘤发生过程中扮演抑癌基因的角色，并与肿瘤的生物学特性及患者预后密切相关［1］，而关于DX2对胃癌的研究不多. E钙粘蛋白(Eadherin, Ead)是钙黏附蛋白分子家族中的一种跨膜蛋白亚型，集中表达粘着连接. 主要功能是介导上皮细胞与上皮细胞的黏附、维持组织正常形态结构. 关于Ead的表达与胃癌浸润、转移的关系，国内外新近有不少相关报道［2］，但结果不一. 基于以上原因，我们采用免疫组化方法检测86例胃癌组织中DX2和Ead的表达情况，探讨二者与胃癌发生、浸润、转移及预后的关系.
1对象和方法
1.1对象2000/2002胃癌手术标本86(男55，女31)例；年龄52.8±11.2 ( 32～72)岁. 全部获病理学诊断. 患者术前均未行化放疗. 随访时间5～60 . 分别根据国际胃癌新PTN分期标准、Lauren分类法、胃癌组织学分类标准及淋巴转移情况对病例进行分组.正常对照组标本15例，为距胃癌边缘10 以上的胃黏膜组织，经病理学检查证实为无癌肿浸润.
1.2方法采用免疫组织化学染色SAB法，标本经40 g/L中性多聚甲醛固定,石蜡包埋，4 μ连续切片，70℃烤片15 in，梯度乙醇脱水，30 L/L H22灭活内源酶，PBS漂洗5 in×3次. 正常羊血清室温孵育15 in. 滴加20～30 μL PBS稀释的一抗(1∶5的HED1 Ab) 4℃过夜. PBS 漂洗5 in×3次. 二抗、三抗依次37℃孵育45 in，PBS漂洗5 in×3次. DAB显色5～10 in，自来水充分洗涤，苏木素复染5 in，稀盐酸淡化30 s，冲洗5 in. 脱水、透明、封片，镜检. 设阳性对照, 用PBS替代第一抗体作阴性对照. 鼠抗人DX2 Ab（工作浓度1∶50）、鼠抗人Ead Ab（工作浓度1∶50）和免疫组化采用链霉菌抗生素蛋白过氧化物酶法染色(SAB法),试剂盒均为Santa ruz公司生产，购自北京中山生物技术有限公司. DX2蛋白表达阳性为胞核出现棕黄色颗粒. Ead免疫染色阳性物质呈棕褐色，正常染色主要定位于细胞膜，即连续的细胞膜染色. 超过40%细胞DX2阳性表达记为阳性，否则记为阴性；而Ead在胃癌组织中则为异常表达，超过30%细胞Ead异常表达记为阳性，否则记为阴性［3-4］.
统计学处理：所有数据用SPSS 13.0处理, 计数资料采用χ2检验. 生存 分析 用KaplanEier法. P<0.05为差异具有统计学意义.
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