【摘要】 目的: 探讨TLR4在脑出血大鼠血肿周围脑组织中的表达变化及其作用. 方法 : 采用自体尾动脉血注入法制作脑出血大鼠模型,将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组,造模完毕后按不同时间点(术后6,24,48,72 h和7 d)随机分为5个亚组,每组5只. 各组于不同时间点取材,采用反转录多聚酶链反应(RTPR)方法检测大鼠脑组织TLR4 RNA的相对表达. 结果: 各实验组各时间点TLR4 RNA均表达,假手术组TLR4 RNA的相对表达在各时间点无显著差异(P>0.05);模型组与假手术组相比TLR4 RNA相对表达显著升高(P<0.05),且在48 h达高峰,持续到72 h. 模型组相同时间点TLR4 RNA的相对表达与假手术组比较均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01). 结论: 脑出血大鼠模型TLR4表达增高,提示TLR4在脑出血炎症损伤中可能具有一定作用.
【关键词】 脑出血;大鼠;Tll样受体
【Abstrat】 AI: T explre the expressin f Tll like reeptr 4 (TLR4) in brain tissue surrunding heata f erebral herrhage rats and its rle in brain inflaatry injury. ETHDS: The erebral herrhage dels f rats ere ade by injeting autlgus arterial bld lleted fr audal artery. Fifty ale SD rats ere randly divided int 2 grups: sha peratin and del grups. The expressin f TLR4 RNA in the brain tissue surrunding heata as deterined siultaneusly by RT PR. RESULTS: The expressin f TLR4 gene in del grup as higher evidently than that in sha peratin grup(P<0.05). NLUSIN: The expressin f TLR4 is inreased in brain tissue surrunding heata f erebral herrhage rats. It is indiated that TLR4 is inreased in brain tissue surrunding heata f erebral herrhage rats, hih indiates that TLR4 ight be invlved in inflaatry reatins f intraerebral herrhage.
【Keyrds】 intraerebral herrhage; rat; Tll like reeptr
0 引言
脑血管病是临床常见病之一,尤其脑出血具有较高的发生率、致残率、病死率,其中一个很重要的原因是出血后水肿的形成和 发展 ,现已证明脑出血后的炎症反应是脑水肿的直接原因[1]. Tll 样受体4 (Tll like reeptr 4, TLR4)在跨膜信号转导受体家族 TLRs中占有重要的位置[2], 可介导细菌内毒素(lipplysaharide,LPS)诱导的炎症反应. 研究 [3-4]发现, TLR4 与心、肝、脑缺血性非生物性炎性损伤关系密切,但TLR4 是否也参与了脑出血非生物性炎性损伤尚不清楚,我们采用自体尾动脉血注入法建立大鼠脑出血模型,初步探讨TLR4在脑出血非生物炎性损伤中的作用.
1 材料和方法
1.1 材料 健康雄性SD大鼠 50只,体质量300 ~350 g,由河北医科大学基础医学院动物实验中心提供[许可证号DK0403007],清洁级. NARISHIGE SR6N脑立体定向仪(日本); 电子 天平(日本AND HR120,精确度为0.1 g); RTPR相关试剂(美国Preger公司);所用引物由上海生物工程技术服务有限公司合成;PR扩增仪(德国Eppendrf公司,572H);低温离心机(德国Eppendrf公司,5417R),凝胶成像 分析 系统(德国Eppendrf公司,SYNGENE).
1.2 方法
1.2.1模型制作 参照本实验室的方法进行[5],即将动物用水合氯醛按35 g/kg腹腔注射麻醉后,取尾动脉不抗凝血50 μL, 应用 脑立体定向技术注入大鼠脑内右侧尾壳核,术毕用医用骨蜡封闭针孔. 假手术组只进针不注血.
1.2.2动物分组 将大鼠随机分为脑出血组(25只)、假手术组(25只). 造模完毕后按不同时间点随机分为5个亚组,即术后6,24,48,72 h和7 d,每组5只.
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